雌二醇Elisa試劑盒的樣本處理要求

　　雌二醇Elisa試劑盒是一種基于競爭法原理的固相酶免吸附實驗（ELISA）。反應板上的微檢測孔包被有能結合雌二醇分子上獨特抗原位點的單克隆抗體。一份含有內源性雌二醇的病人樣本與辣根過氧酶標記的雌二醇競爭性的結合包被板上的抗體。溫育之后，未結合的酶聯物用洗滌液洗去。過氧酶與包被抗體的結合量與樣品中雌二醇的濃度成反比。加入底物液后，所顯示的顏色強度與病人樣品中雌二醇的濃度成反比。

　　雌二醇Elisa試劑盒樣本處理及要求：

　　1.血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜，然后1000×g離心20分鐘，取上清即可，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

　　2.血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

　　3.組織勻漿：用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

　　雌二醇Elisa試劑盒的結果計算：

　　1.計算每個標準品、質控品和病人樣本的平均吸光度值。

　　2.用吸光度值作為縱坐標（y），濃度值作為橫坐標（x），以每個標準品的吸光度值對其相應的濃度值進行標繪，作一標準曲線。

　　3.用每一樣品的平均吸光度值在標準曲線上確定其相應的濃度。

　　4.自動計算方法：在IFU上，它用四參數曲線已自動計算出結果。其它的歸納方法可能會得出稍微不同的結果。

　　5.樣品的濃度可直接從標準曲線上讀取。樣品中HPL濃度高于高標準品的必須用進行進一步的稀釋。在計算樣品濃度時就應當把此稀釋因子考慮進去。